- 导语 -

2026年，中国外泌体药物监管框架加速落地。一个信号已经足够清晰：外泌体产业已从“概念竞争”正式迈入“CMC驱动时代”。对于药企与临床研究机构而言，真正的挑战不再是“能否获得外泌体”，而是“能否稳定、可放大、可追溯地生产符合监管要求的合规外泌体”。

外泌体的CMC合规，始于对“背景”的清零。本系列开篇，我们直击外泌体CMC合规中最隐蔽、也最具颠覆性的风险——背景外泌体。

背景外泌体的来源

1.什么是背景外泌体

背景外泌体（Background Exosomes）是指在外泌体药物制剂的规模化制备过程中，因上游细胞培养阶段使用含有血清或血清替代物的非化学成分限定培养基，而人为引入的一类非目标细胞来源的外源性胞外囊泡及相关颗粒状杂质。

胎牛血清（FBS）是传统细胞培养中最常用的添加物，但它本身含有大量牛源外泌体。每毫升胎牛血清约含1×10⁹~10¹⁰个外泌体颗粒，这些血清自带的外泌体在粒径（30-150nm）和物理特性上与目标MSC外泌体高度相似，会随超速离心、尺寸排阻色谱等纯化步骤一同被收集，导致最终产量数据“虚高”。

部分研究者转而采用人血小板裂解物（HPL）作为血清替代物，试图规避牛源外源病毒风险。然而，HPL同样面临背景外泌体的困扰——它含有大量蛋白因子、聚体和颗粒，粒径与外泌体接近，同样会造成“产量虚高”的假象。

2.为什么背景外泌体难以去除

背景外泌体与目标外泌体存在“同尺寸、同密度、同沉降行为”，后期纯化几乎无法以“去除杂质”的逻辑将其分离。目前下游基于尺寸或密度原理的纯化工艺在分辨效能上存在固有极限，这就导致了背景外泌体一旦引入，后期几乎无法彻底清除：

① 差速超速离心

基于粒径和沉降系数的差异进行分离。然而外泌体（30-150 nm）与血清来源的牛源外泌体、蛋白聚集体、脂蛋白复合物在粒径和沉降行为上高度重叠，单纯依靠离心力难以实现有效区分；

② 尺寸排阻色谱（SEC）

基于分子筛效应按粒径大小分离。虽然SEC能够有效去除白蛋白等可溶性蛋白污染物，但对于粒径与外泌体相近的杂质颗粒，其分辨率本身存在物理极限——当目标物与杂质的流体力学半径差小于色谱柱的分辨率阈值时，二者将共洗脱；

③ 密度梯度离心

虽然可以获得较高纯度，但操作极为耗时，且收率损失严重，多停留于分析级别，难以支撑规模化生产；

因此，无论MSC种源多优质、分离工艺多完善，只要培养基里含有血清或血替，背景外泌体就必然存在。

唯有全程采用无血清、化学成分明确的培养基，才能从源头彻底消除背景外泌体污染。

监管红线：上清收集阶段禁止血清

2026年4月，国家卫生健康委员会发布《细胞组分及衍生物治疗新技术临床研究备案指引（第1版）》，在政策层面正式确认了外泌体制备过程中培养基的分阶段使用原则，并明确作出了禁止性规定。

“在细胞组分及衍生物制剂的制备过程中，通常分为细胞扩增培养和细胞上清收集两个阶段。上清收集阶段所用培养基应不含血清及其替代物，成分明确，符合无菌、无致病性微生物及内毒素的质量标准，并明确来源、批号且质量检定合格，以避免血清及替代物残留引入蛋白质及颗粒污染。”

该条款的监管意图非常明确：上清收集阶段——即产品直接产生的环节，禁止使用含血清及其替代物的培养基。

面对这一监管格局，血清/血替体系下的外泌体面临深层的合规困境：进入临床阶段的产品，必须向监管机构完整披露培养基配方。若配方中含有血清或血替，则极易触发一票否决。

从源头消除背景外泌体的合规方案

合规的外泌体产品，不是完全靠后期纯化“洗”出来的，而是从细胞培养的第一步就“养”出来的。选择一款背景干净、成分明确、经过验证的无血清培养基，不是增加成本，而是为下游纯化“减负”，为申报资料“加分”。与其在下游花费数倍成本去“去除”污染，不如在上游源头“杜绝”污染。

针对背景外泌体这一最隐蔽的合规风险，6776永利集团GMP级间充质干细胞无血清培养基2.0系列从底层配方设计上给出了根本性解决方案。

GMP级间充质干细胞无血清培养基2.0

1.摆脱纯化瓶颈：

彻底摒弃任何动物源血清、人源血清或血小板裂解物。从根本上清除了培养基自带的外源外泌体与微囊泡背景，从而将引入的背景外泌体量降至极低（约1E8/mL的水平）；增加易洗涤去除的非蛋白类组分，减少生长因子种类与含量，极大降低了客户后期制剂残留去除难度，简化CMC物料研究与残留检测工作。

2.降低申报风险：

按GMP标准生产，经过严格的微生物、病毒、内毒素检测，同时批次间稳定性高，保证供体细胞培养与外泌体制备的可重复性；

已正式获得美国FDA DMF备案（备案号：31623），为药企的中美双报提供便利。面对NMPA、FDA、EMA日益趋严的监管要求，其“无血清、无动物源、无血替”的技术路线具备长期安全性，不会因未来监管政策收紧而面临工艺叫停风险。

3. 极致兼容，无缝覆盖全工艺流程：

兼容市场主流品牌种子库，无需繁琐驯化。同时广泛适配细胞工厂、微载体、生物反应器等2D及3D大规模培养模式。